1. Təsnifat
Gel elektroforezi şaquli növlərə (sütun gelləri və plitə gelləri daxil olmaqla) və üfüqi tiplərə (əsasən plitə gelləri) bölünür (Şəkil 6-18). Ümumiyyətlə, şaquli ayırma üfüqidən bir qədər üstündür, lakin üfüqi gel hazırlamağın ən azı dörd üstünlüyü var: bütün gelin altında dəstək var, aşağı konsentrasiyalı agarozun istifadəsinə imkan verir; müxtəlif spesifikasiyalı agaroz gel plitələrinin hazırlanması mümkündür; gel hazırlanması və nümunənin yüklənməsi daha rahatdır; elektroforez kamerasını qurmaq asandır və qənaətcildir. Horizontal elektroforez, elektroforez tamponunun səthindən təxminən 1 mm aşağıda tam batırılmış agaroz gel lövhəsi ilə həyata keçirildiyi üçün buna sualtı elektroforez də deyilir.
Agaroz gel elektroforezi üçün DYCP-31DN elektroforez tankı
2. Bufer sistemi
Nuklein turşularının ayrılması zamanı əksər sistemlər davamlı sistemləri qəbul edir. Ümumi istifadə olunan elektroforez tamponlarına TBE (0,08mol/L Tris·HCl, pH 8,5, 0,08mol/L bor turşusu, 0,0024mol/L EDTA) tamponu və THE (0,04mol/L Tris·HCl, pH 7,8, 0,02mol/L) daxildir. natrium asetat, 0,0018mol/L EDTA) tamponu. Bu tamponlar ümumiyyətlə 10x ehtiyat məhlulları şəklində hazırlanır və istifadə zamanı lazımi konsentrasiyaya qədər seyreltilir. Agaroz geldə xətti və dairəvi DNT-nin miqrasiya dərəcələri istifadə olunan buferə görə dəyişir. THE buferdə xətti DNT-nin miqrasiya sürəti dairəvi DNT-dən daha böyükdür, TBE buferində isə bunun əksi doğrudur.
3.Agaroza Gelinin Hazırlanması
(1) Horizontal Agaroza Gelinin Hazırlanması
(a) 1x elektroforez tamponundan istifadə edərək lazımi agaroz gel konsentrasiyasını hazırlayın.
(b) Qaynar su banyosunda, maqnit qarışdırıcıda və ya mikrodalğalı sobada həllini tamamlamaq üçün agarozu qızdırın. Agaroza məhlulunu 55°C-yə qədər soyudun və etidium bromid (EB) boyasını 0,5 mkq/ml yekun konsentrasiyaya əlavə edin.
(c) Şüşə və ya akril plitələrin kənarlarını az miqdarda agaroz gel ilə bağlayın, bir daraq əlavə edin və daraq dişlərini boşqabdan təxminən 0,5~1,0 mm yuxarı yerləşdirin.
(d) Ərinmiş agaroza gel məhlulunu davamlı olaraq şüşə və ya akril boşqab qəlibinə tökün (qalınlıq DNT nümunəsinin həcmindən asılıdır), hava qabarcıqlarının daxil olmasına yol vermədən. Otaq temperaturunda təbii şəkildə bərkiməsinə icazə verin.
(e) Tam bərkidikdən sonra tarağı ehtiyatla çıxarın. Gel çəninə müvafiq miqdarda elektroforez tamponu əlavə edin, gel boşqabının elektroforez tamponunun səthindən təxminən 1 mm aşağıda batmasını təmin edin.
(2) Şaquli Agaroza Gelinin Hazırlanması
(a) Şüşə lövhələrdən yağ və ya qalıqları etanol ilə yuyaraq təmizləyin.
(b) Ön və arxa bəndlər arasında aralıq plitələrini yerləşdirin, aralıq plitələrinin kənarlarını ön və arxa bəndlərlə hizalayın və onları sıxaclarla bərkidin.
(c) gel tökmə kamerasının dibində 1 sm hündürlüyündə agaroza tıxacını meydana gətirmək üçün boşluq plitələrinin kənarları arasında 1x tamponda 2% agaroza əlavə edin.
(d) 1x tamponda hazırlanmış istənilən konsentrasiyada ərinmiş agaroza geli yuxarıdan 1 sm aşağıya qədər gel kamerasına tökün.
(e) Daraq dişlərinin altında hava qabarcıqlarının qalmamasına yol verərək tarağı daxil edin. Bəzən agaroz geli soyutma zamanı daraq dişlərində qırışlar görünə bilər; belə hallarda, bərkitmək üçün üstünə bir az ərinmiş agaroza əlavə edin.
(f) Darağı çıxarın. Yükləmə yuvasında bufer sızmasının qarşısını almaq üçün agaroza gel lövhəsi ilə elektroforez kamerası arasındakı əlaqəni 2% agaroza ilə bağlayın və lazımi miqdarda bufer əlavə edin.
(g) Gel kamerasına 1x elektroforez buferi əlavə edin.
(h) Diqqətlə DNT nümunələrini buferin altındakı agaroza gelə yükləyin.
Agaroz gel elektroforezi haqqında əsas biliklər haqqında daha çox məlumatı gələn həftə paylaşacağıq. Bu məlumatların təcrübəniz üçün faydalı olmasını arzulayın.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) öz peşəkar texniki komandamız və R&D mərkəzimizlə 50 ildən artıq elektroforez alətləri istehsalında ixtisaslaşmışdır. Dizayndan tutmuş yoxlamaya, anbara, eləcə də marketinq dəstəyinə qədər etibarlı və tam istehsal xəttimiz var. Əsas məhsullarımız Elektroforez Hüceyrəsi (tank/kamera), Elektroforez Enerji Təchizatı, Mavi LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Şəkil və Analiz Sistemi və s.
İndi tərəfdaşlar axtarırıq, həm OEM elektroforez tankı, həm də distribyutorlar qarşılanır.
Məhsullarımız üçün hər hansı bir satınalma planınız varsa, bizimlə əlaqə saxlamaqdan çəkinməyin. Bizə e-poçt ünvanına mesaj göndərə bilərsiniz[email protected]və ya[email protected], və ya +86 15810650221 nömrəsinə zəng edin və ya Whatsapp +86 15810650221 və ya Wechat: 15810650221 əlavə edin.
Whatsapp və ya WeChat-a əlavə etmək üçün QR kodunu skan edin.
Göndərmə vaxtı: 07 dekabr 2023-cü il