Agaroz Gel Elektroforezinin Əsas Texnikaları(2)

Nümunənin hazırlanması vəYüklənir

Əksər hallarda gel yığmadan davamlı bufer sistemindən istifadə edildiyinə görə nümunələr müvafiq konsentrasiyaya və kiçik həcmə malik olmalıdır. istifadə edin apipetqətnamənin əhəmiyyətli dərəcədə azalmasının qarşısını almaq üçün nümunəni hər quyuya 5-10 μg olmaqla yavaş-yavaş əlavə etmək. Nə vaxtyükləmə nümunəsi, enerji təchizatı söndürülməlidir. Nümunənin sıxlığını artırmaq, nümunəni konsentrasiya etmək və yayılmasının qarşısını almaq üçün indikator boyası (0,025% bromofenol mavisi və ya narıncı) və saxaroza (10-15%) və ya qliserol (5-10%) olmalıdır. Bununla belə, bəzən saxaroza və ya qliserin elektroforez nəticələrində U-şəkilli zolaqlara səbəb ola bilər ki, bunun qarşısını 2,5% Ficoll (polivinilpirolidon) istifadə etməklə almaq olar.

1

Elektroforez

Elektroforez üçün gərginlik 5-15 V/sm, ümumiyyətlə 10 V/sm-dir. Böyük molekulların ayrılması üçün gərginlik aşağı olmalıdır, adətən 5 V/sm-dən çox olmamalıdır.

2

Boyanma

Flüoresan boya etidium bromid (EB) adətən agaroz geldə DNT zolaqlarını müşahidə etmək üçün boyanma üçün istifadə olunur. EB DNT molekullarının baza cütləri arasına daxil ola bilər və EB-nin DNT ilə bağlanmasına səbəb olur. 260 nm ultrabənövşəyi işığın DNT tərəfindən udulması EB-yə ötürülür və bağlı EB görünən işıq spektrinin qırmızı-narıncı bölgəsində 590 nm-də flüoresans yayır. Gelin 1 mmol/L MgSO4 məhlulunda 1 saat ərzində rənglənməsi, bağlanmamış EB-nin yaratdığı fon flüoresansını azalda bilər, az miqdarda DNT-nin aşkarlanmasını asanlaşdırır.

EB boyasının bir sıra üstünlükləri var: istifadəsi asandır, nuklein turşularını parçalamır, yüksək həssaslığa malikdir, həm DNT, həm də RNT-ni ləkələyə bilir. EB nümunəyə əlavə edilə və istənilən vaxt UV absorbsiyasından istifadə edərək izlənilə bilər. Boyandıqdan sonra EB n-butanol ilə ekstraksiya yolu ilə çıxarıla bilər.

Bununla belə, EB boyası güclü mutagendir və rəftar zamanı polietilen əlcəklər taxmaq kimi ehtiyat tədbirləri görülməlidir. Akridin narıncı həm də çox istifadə edilən boyadır, çünki o, tək və iki zəncirli nuklein turşularını (DNT, RNT) fərqləndirə bilir. O, iki zəncirli nuklein turşuları üçün yaşıl flüoresan (530 nm) və tək zəncirli nuklein turşuları üçün qırmızı flüoresans (640 nm) nümayiş etdirir. Bundan əlavə, metilen mavisi, metilen yaşıl və quinolin B kimi digər boyalar boyanma üçün istifadə edilə bilər.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) öz peşəkar texniki komandamız və R&D mərkəzimizlə 50 ildən artıq elektroforez alətləri istehsalında ixtisaslaşmışdır. Dizayndan tutmuş yoxlamaya, anbara, eləcə də marketinq dəstəyinə qədər etibarlı və tam istehsal xəttimiz var. Əsas məhsullarımız Elektroforez Hüceyrəsi (tank/kamera), Elektroforez Enerji Təchizatı, Mavi LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Şəkil və Analiz Sistemi və s.

3

İndi tərəfdaşlar axtarırıq, həm OEM elektroforez tankı, həm də distribyutorlar qarşılanır.

Məhsullarımız üçün hər hansı bir satınalma planınız varsa, bizimlə əlaqə saxlamaqdan çəkinməyin. Bizə e-poçt ünvanına mesaj göndərə bilərsiniz[email protected]və ya[email protected], və ya +86 15810650221 nömrəsinə zəng edin və ya Whatsapp +86 15810650221 və ya Wechat: 15810650221 əlavə edin.

Whatsapp və ya WeChat-a əlavə etmək üçün QR kodunu skan edin.

2


Göndərmə vaxtı: 20 dekabr 2023-cü il