Gel elektroforezinin optimallaşdırılması: nümunənin həcmi, gərginliyi və vaxtı üçün ən yaxşı təcrübələr

Giriş

Gel elektroforezi molekulyar biologiyada zülalların, nuklein turşularının və digər makromolekulların ayrılması üçün geniş istifadə olunan əsas texnikadır. Nümunə həcminə, gərginliyə və elektroforez vaxtına düzgün nəzarət dəqiq və təkrarlana bilən nəticələr əldə etmək üçün çox vacibdir.Laboratoriya əməkdaşımız təklif edirSDS-PAGE gel elektroforezi zamanı bu parametrləri idarə etmək üçün ən yaxşı təcrübələr.

3

Pekin Liuyi Biotexnologiya gel elektroforez məhsulları

Nümunə Həcmi: Ardıcıllığın təmin edilməsi

SDS-PAGE elektroforezini yerinə yetirərkən, nümunənin həcmi nəticələrinizin həllinə əhəmiyyətli dərəcədə təsir edə biləcək əsas amildir. Ümumiyyətlə hər quyuya 10 µL ümumi protein yükləmək tövsiyə olunur. Ardıcıllığı təmin etmək və bitişik quyular arasında nümunə diffuziyasının qarşısını almaq üçün istənilən boş quyuya bərabər həcmdə 1x yükləmə tamponunun yüklənməsi vacibdir. Bu tədbir quyu boş qaldıqda baş verə biləcək nümunələrin qonşu zolaqlara yayılmasının qarşısını almağa kömək edir.

Nümunələrinizi yükləməzdən əvvəl həmişə bir quyuya molekulyar çəki markerini əlavə etməklə başlayın. Bu, elektroforezdən sonra zülal ölçülərini asanlıqla müəyyən etməyə imkan verir.

1

Gərginliyə Nəzarət: Sürət və Qətnaməni balanslaşdırmaq

Elektroforez zamanı tətbiq olunan gərginlik həm nümunələrin gel vasitəsilə miqrasiya sürətinə, həm də ayrılmanın həllinə birbaşa təsir göstərir. SDS-PAGE üçün təxminən 80V aşağı gərginliklə başlamaq məsləhətdir. Bu ilkin aşağı gərginlik nümunələrin yavaş-yavaş və bərabər şəkildə miqrasiya etməsinə imkan verir, ayırıcı gelə daxil olduqda onları kəskin zolaqda cəmləşdirir.

Nümunələr ayırıcı gelə tam daxil olduqdan sonra gərginliyi 120V-ə qədər artırmaq olar. Bu yüksək gərginlik miqrasiyanı sürətləndirir, zülalların molekulyar çəkilərinə görə səmərəli şəkildə ayrılmasını təmin edir. Elektroforezin tamamlandığını göstərən bromofenol mavi boya cəbhəsinin gedişatını izləmək vacibdir. 10-12% konsentrasiyası olan gellər üçün adətən 80-90 dəqiqə kifayətdir; lakin, 15% gellər üçün işləmə müddətini bir qədər uzatmaq lazım ola bilər.

Vaxtın İdarə Edilməsi: Nə vaxt dayanacağını bilmək

Zamanlama gel elektroforezində başqa bir kritik amildir. Gelin çox uzun və ya çox qısa müddətə işlədilməsi suboptimal ayrılmağa səbəb ola bilər. Bromofenol mavi boyasının miqrasiyası faydalı bir göstəricidir: gelin dibinə çatdıqda, adətən qaçışı dayandırmaq vaxtıdır. 10-12% kimi standart gellər üçün təxminən 80-90 dəqiqə elektroforez müddəti adətən adekvatdır. Daha yüksək faizli gellər üçün, məsələn, 15%, zülalların tam ayrılmasını təmin etmək üçün işləmə müddəti uzadılmalıdır.

Buferin İdarə Edilməsi: Buferlərin Yenidən İstifadəsi və Hazırlanması

Elektroforez tamponu laboratoriyanızın xüsusi şərtlərindən asılı olaraq 1-2 dəfə təkrar istifadə edilə bilər. Bununla belə, optimal nəticələr üçün təzə 10x tampon hazırlamaq və istifadə etməzdən əvvəl onu seyreltmək tövsiyə olunur. Bu, tamponun effektivliyini qoruyub saxlamasını təmin edir və daha etibarlı elektroforez nəticələrinə gətirib çıxarır.

2

Pekin Liuyi Biotexnologiya gel elektroforez məhsulları

Nümunə həcminə, gərginliyə və elektroforez vaxtına diqqətlə nəzarət etməklə, gel elektroforez nəticələrinizin dəqiqliyini və təkrar istehsalını əhəmiyyətli dərəcədə yaxşılaşdıra bilərsiniz. Laboratoriya işinizdə bu ən yaxşı təcrübələri tətbiq etmək sizə daha aydın və daha fərqli zolaqlar əldə etməyə kömək edəcək və aşağı axın təhlili üçün daha yaxşı məlumat əldə edəcəksiniz.

Gel elektroforez təcrübəsini optimallaşdırmaq üçün daha yaxşı üsullarınız varsa, bizimlə müzakirə etməyə xoş gəlmisiniz!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) öz peşəkar texniki komandamız və R&D mərkəzimizlə 50 ildən artıq elektroforez alətləri istehsalında ixtisaslaşmışdır. Dizayndan tutmuş yoxlamaya, anbara, eləcə də marketinq dəstəyinə qədər etibarlı və tam istehsal xəttimiz var. Əsas məhsullarımız Elektroforez Hüceyrəsi (çən/kamera), Elektroforez Enerji Təchizatı, Mavi LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Şəkil və Analiz Sistemi və s. Biz həmçinin laboratoriya üçün PCR aləti, burulğan qarışdırıcı və sentrifuqa kimi laboratoriya alətlərini təmin edirik.

Məhsullarımız üçün hər hansı bir satınalma planınız varsa, bizimlə əlaqə saxlamaqdan çəkinməyin. Bizə e-poçt ünvanına mesaj göndərə bilərsiniz[email protected]və ya[email protected], və ya +86 15810650221 nömrəsinə zəng edin və ya Whatsapp +86 15810650221 və ya Wechat: 15810650221 əlavə edin.

Whatsapp və ya WeChat-a əlavə etmək üçün QR kodunu skan edin.

2


Göndərmə vaxtı: 20 avqust 2024-cü il