Gel elektroforezi DNT analizi üçün molekulyar biologiyada istifadə edilən əsas üsullardan biridir.Bu üsul DNT fraqmentlərinin bir gel vasitəsilə miqrasiyasını nəzərdə tutur, burada onlar ölçü və ya forma əsasında ayrılır.Bununla belə, elektroforez təcrübələriniz zamanı heç bir səhvlə qarşılaşmısınızmı, məsələn, agaroza geldə ləkələnmiş zolaqlar və ya geldə heç bir bant yoxdur?Bu səhvlərin səbəbi nə ola bilər?
Texniki mütəxəssislərimiz sizin arayışınız üçün burada nasazlıqların aradan qaldırılması cütlərini ümumiləşdirmişlər.
1. Agaroz gel üzərində bulaşmış bantlar
●DNT pozuldu.Nukleaz çirklənməsinin qarşısını alın.
● Elektroforez tamponu təzə deyil.Elektroforez tamponunun təkrar istifadəsindən sonra ion gücü azalır və onun pH dəyəri artır, buna görə də bufer tutumu zəifləyir, bu da elektroforez effektinə təsir göstərir.Elektroforez tamponunun tez-tez dəyişdirilməsi tövsiyə olunur.
● Yanlış elektroforez şərtlərindən istifadə edilmişdir.Gərginliyin 20 V/sm-dən çox olmasına icazə verməyin və elektroforez zamanı temperaturu <30°C-dən çox saxlamayın.Nəhəng DNT zəncirinin elektroforezi üçün temperatur <15° C olmalıdır. Elektroforez tamponunun kifayət qədər tampon tutumuna malik olduğunu yoxlayın.
● Gelə çoxlu DNT yüklənib.DNT miqdarını azaldın.
● DNT-də çoxlu duz.Qabaqcıl vəziyyətdə artıq duzları çıxarmaq üçün etanol yağıntısından istifadə edin.
● DNT zülalla çirklənmişdir.Qabaqcıl şəkildə zülal çıxarmaq üçün fenol ekstraksiyalarından istifadə edin.
● DNT denatürasiya edilib.Elektroforezdən əvvəl qızdırmayın.20 mM NaCl ilə buferdə DNT-ni seyreltin.
2. DNT zolağının miqrasiyasının anomaliyaları
● λHind III fraqmentinin COS sahəsinin renaturasiyası.Elektroforezdən əvvəl DNT-ni 5 dəqiqə 65 ° C-də qızdırın və sonra 5 dəqiqə buz qurğusunda soyudun.
● Yanlış elektroforez şərtlərindən istifadə edilmişdir.Gərginliyin 20 V/sm-dən çox olmasına icazə verməyin və elektroforez zamanı temperaturu <30°C-dən çox saxlamayın.Elektroforez tamponunun kifayət qədər tampon tutumuna malik olduğunu yoxlayın.
● DNT denatürasiya edilib.Elektroforezdən əvvəl qızdırmayın.20 mM NaCl ilə buferdə DNT-ni seyreltin.
3. Agaroz geldə zəif və ya heç DNT zolaqları yoxdur
● Gelə yüklənmiş DNT-nin kifayət qədər miqdarı və ya konsentrasiyası yox idi.DNT miqdarını artırın.Poliakrilamid gel elektroforezi agaroz elektroforezindən bir qədər daha həssasdır və nümunənin yüklənməsi müvafiq şəkildə azaldıla bilər.
● DNT deqradasiyaya uğradı.Nukleaz çirklənməsinin qarşısını alın.
● DNT geldən elektroforlaşdırılıb.Gel daha az müddət üçün elektroforez edin, daha aşağı gərginlikdən istifadə edin və ya daha yüksək faizli geldən istifadə edin.
● Etidium bromidlə boyanmış DNT-nin vizuallaşdırılması üçün düzgün olmayan W işıq mənbəyi istifadə edilmişdir.Daha yüksək həssaslıq üçün qısa dalğa uzunluğunda (254 nm) W işığından istifadə edin.
4. DNT lentləri əskikdir
●Kiçik ölçülü DNT geldən elektroforasiya edilib.Gel daha az müddət üçün elektroforez edin, daha aşağı gərginlikdən istifadə edin və ya daha yüksək faizli geldən istifadə edin.
● Oxşar molekullu DNT zolaqlarını ayırd etmək çətindir.Elektroforez vaxtını artırın və konsentrasiyanı yoxlayınjelin düzgün istifadə olunacağına əmin olmaq üçün.
● DNT denatürasiya edilib.Elektroforezdən əvvəl qızdırmayın.20 mM NaCl ilə buferdə DNT-ni seyreltin.
● DNT zəncirləri böyükdür və adi gel elektroforezi uyğun deyil.Pulse gel elektroforezində təhlil edin.Agaroz gel elektroforezi ilə bağlı başqa hansı problemləriniz var?Gələcəkdə bələdçilər üçün daha çox araşdırma aparacağıq.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) Çində elektroforezlə əlaqəli məhsullara diqqət yetirən ixtisaslaşmış bir şirkətdir.Onun hekayəsi 1970-ci ildə, Çin hələ islahat və açılış vaxtına girmədiyi zaman başlayır.İllərin inkişafı ilə Liuyi Bitotech, elektroforez məhsulları üçün daxili bazarda Liuyi Markası kimi tanınan öz markasına malikdir.
Liuyi brendinin Çində 50 ildən çox tarixi var və şirkət bütün dünyada sabit və yüksək keyfiyyətli məhsullar təqdim edə bilir.İllərin inkişafı sayəsində seçiminizə layiqdir!
Liuyi Biotech-in üfüqi elektroforez hüceyrələri (çənlər/kameralar) yaxşı görünüşü ilə yüksək keyfiyyətlidir.Müxtəlif ölçülü gel qabları ilə onlar müxtəlif eksperimental tələblərinizə cavab verə bilər.Bizim öz texniki komandamız və fabrikimiz var.Dizayndan tutmuş istehsala, xammaldan əsas hissələrə qədər bütün prosesə nəzarət edə bilərik.DYCP 31 seriyası model olan DNT elektroforezi üçündürDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, vəDYCP-31E.Aralarındakı fərqlər gel ölçüləri və qiymətidir.Müştərilərimiz üçün tam ölçüdə məhsullar təqdim edirik.ModelDYCP-32Cən böyük gel 250mm*250mm edə bilər.
Bu arada, elektroforez enerji təchizatımızı tövsiyə edirikDYY-6C,DYY-6DvəDYY-10Celektroforez hüceyrələrimiz üçün (çənlər/kameralar) DYCP-31 və 32 seriyası.
Məhsullar haqqında daha çox məlumat əldə etmək istəyirsinizsə, lütfən, daha çox məlumat əldə etmək üçün bu vebsayta daxil olun və nə istədiyinizi bizə bildirmək üçün e-poçt vasitəsilə bizimlə əlaqə saxlamağa və sizin üçün həllər təqdim edə biləcəyimizə baxın.
Haqqımızda əlavə məlumat üçün e-poçt vasitəsilə bizimlə əlaqə saxlayın[email protected], [email protected].
Göndərmə vaxtı: 09 may 2022-ci il